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HEPES緩沖液-細(xì)胞培養(yǎng)中的戰(zhàn)斗機(jī)
發(fā)布日期[2023/06/12]

HEPES溶液是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,是一種有機(jī)化工中的兩性離子緩沖劑。該物質(zhì)的分解能力可隨溫度的升高而增強(qiáng),隨溫度的降低而減弱,但與其他緩沖劑相比,它的分解常數(shù)隨溫度變化不大,這使HEPES緩沖液成為在低溫時(shí)可較好地保持酶的結(jié)構(gòu)和功能的緩沖劑。

HEPES緩沖劑能較長時(shí)間控制恒定的pH范圍,對(duì)細(xì)胞無毒性作用,常用于細(xì)胞培養(yǎng)。為了改善BHK一21細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境,保持口蹄疫病毒146S抗原的穩(wěn)定性,提高疫苗內(nèi)完整病毒顆粒的含量,有專家進(jìn)行了培養(yǎng)液緩沖系統(tǒng)的研究。在研究中,進(jìn)行了添加HEPES對(duì)病毒抗原穩(wěn)定性比較試驗(yàn),評(píng)價(jià)其保護(hù)效果。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,用生物緩沖劑HEPES培養(yǎng)的病毒液毒價(jià)高于不用生物緩沖劑的病毒液。在37℃條件下,不含生物緩沖劑的病毒液TCID50(半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量)變化的幅度比含生物緩沖劑的病毒液大,不過需要注意的是:當(dāng)HEPES暴露于光線中時(shí),會(huì)產(chǎn)生過氧化氫,這對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性,因此HEPES作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。

因此可知,生物緩沖劑可以有效地改善病毒培養(yǎng)液緩沖能力,給病毒提供一個(gè)適宜的環(huán)境,促進(jìn)病毒顆粒的穩(wěn)定性。

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